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两种灵芝多糖在抗肿瘤及免疫方面的作用--南京中医药大学陆茵

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admin 发表于 2014-9-30 16:35:15 | 显示全部楼层 |阅读模式
1 实验方法与结果
1.1 多糖对实体型荷瘤小鼠肿瘤(B16BL6)生长的影响作用
C57BL6小鼠90只,雌雄各半,随机分为9组,每组10只,分别为多糖PI组(0.050.10.2g·kg-1)、多糖PII组(0.050.10.2 g·kg-1)、云芝多糖组(1.65g·kg-1)、5-FU组(0.02g·kg-1)、模型组(等体积NS),除5-FU组腹腔注射给药外,其余各组均灌胃给药。以0.25%胰酶消化贴壁生长良好的B16BL6黑色素瘤细胞,加培养液800rpm离心弃上清,再以无血清培养基混悬肿瘤细胞,调整细胞数。然后于每只小鼠右侧腹股沟皮下处接种肿瘤细胞悬液0.2ml(106),接种次日开始灌胃给药,连续20天,每日观察记录小鼠腹股沟皮下处肿瘤生长情况、小鼠活动状态以及小鼠死亡情况。给药结束后处死小鼠,剥取分离瘤组织,以电子天平称重,记录瘤重。将瘤组织于50下干燥24小时,记录干重。计算抑瘤率。
抑瘤率=1-给药组瘤重/模型组瘤重)×100%
<!--[if !vml]--> <!--[endif]-->表8-13多糖对实体型(B16BL6)荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用(X±SD
组别
剂量(g/kg
实体瘤重(湿重)
抑瘤率(%
实体瘤重(干重)
模型组
5-FU
PI-1
PI-2
PI-3
PII-1
PII-2
PII-3
云芝多糖
——
0.02
0.20
0.10
0.05
0.20
0.10
0.05
1.65
5.399±1.205
1.218±0.439**
3.711±1.092*
4.309±0.800*
4.546±2.060
4.430±0.941*
4.397±1.207
6.202±1.190
4.266±1.180
100
77.4
31.3
20.2
15.8
17.9
18.6
——
21.0
1.715±0.207
0.959±0.068**
1.373±0.192**
1.434±0.243*
1.445±0.369
1.478±0.111*
1.469±0.362
1.737±0.183
1.470±0.325
注:*P<0.05**P<0.01
在腹股沟处接种B16BL6肿瘤细胞后约6天,开始有可触及之肿块,再往后肿块逐渐增大,到20天模型组肿块已大如桃核,肿瘤在体生长良好。多糖给药组小鼠腹股沟处肿块生长与模型组小鼠接近,其生长速度较慢,表现为多糖PIPII各剂量(除PII低剂量外)瘤重均较模型组小,其中PI高中剂量、PII高剂量瘤重与模型组比较有显著性差异(P<0.01P<0.05),说明两多糖在抑制移植性实体型肿瘤方面都有一定作用,以多糖PI为佳。
1.2  多糖对腹水型荷瘤小鼠肿瘤(S180)生长的影响作用
取处于对数生长期的S180细胞,以0.25%胰酶消化,再以无血清培养基稀释成细胞悬浮,将此细胞悬液腹腔注射接种到ICR小鼠体内,层流架中饲养观察,待小鼠腹部胀大时(即小鼠体内肿瘤细胞已迅速增殖),准备第二次小鼠接种。
ICR小鼠90只,雌雄各半,随机分为9组,每组10只,分别为多糖PI组(0.050.10.2g·kg-1)、多糖PII组(0.050.10.2g·kg-1)、云芝多糖组(0.4g·kg-1)、5-FU组、模型组(等体积NS),除5-FU组腹腔注射给药外,其余各组均灌胃给药。
取上述接种过并且肿瘤生长正常的ICR小鼠,抽取腹水,以生理盐水稀释,制成肿瘤细胞悬液并调整细胞数,每只小鼠腹腔注射接种肿瘤细胞悬液0.2ml(106),接种次日开始给药,连续20天,每日观察记录小鼠腹腔情况、活动状况以及小鼠死亡情况。根据小鼠死亡率采用卡方检验统计结果。

表8-14 腹水型荷瘤小鼠肿瘤(S180)生长的抑制作用(X±SDn=10
<!--[if !vml]--><!--[endif]-->组别
(g·kg-1)
死亡率
x2
模型组
5-Fu
PI-1
PI-2
PI-3
PII-1
PII-2
PII-3
云芝多糖
——
0.02
0.20
0.10
0.05
0.20
0.10
0.05
1.65
100%
20%
50%
60%
80%
70%
80%
100%
100%
——
13.33**
6.67**
5.00*
2.22
3.52
2.22
——
——
注:*P<0.05**P<0.01
接种腹水型S180肿瘤细胞的小鼠在十天后表现为腹部胀大,精神萎靡,活动减少,并逐渐开始出现死亡,在20天左右模型组小鼠全部死亡,多糖给药小鼠亦出现上述表现,但其死亡率有所下降,其中多糖PI高中剂量与模型组比较有明显差异,显示其能延缓小鼠的死亡时间,对肿瘤有一定的抑制作用。
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